原子間力顕微鏡(AFM)のアサイラム テクノロジー 原子間力顕微鏡(AFM)のアサイラム テクノロジー
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 生体試料 
材料科学 高分子 ナノリソグラフィーとマニピュレーション フォースカーブ

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内皮細胞

左上から順に、内皮細胞の明視野、蛍光、そして、AFMの同時観察イメージ。

これらのイメージは、倒立型光学顕微鏡に搭載した、MFP-3D分子間力プローブ顕微鏡(AFM)システムで測定。




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上皮細胞

蛍光と白色光の中で観察した上皮細胞とカンチレバー。




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緑膿菌

光学顕微鏡像を利用して、サンプルのバクテリアを探すことと、カンチレバーの位置合わせをします。細胞の硬さを調べるためにバクテリア細胞の上で力学測定を行いました。サンプルは緑膿菌でGFPを示しています。フォースカーブでは、青のカーブはサンプルから探針が離れるときのカンチレバーの振れを示し、赤のカーブは探針が近づくときのものを示しています。バクテリアの表面におけるフォースカーブとガラス基板上のフォースカーブを比較しています。最も大きな特徴は、大きな吸着力にあります(青のカーブで、針を引き離すときに、大きなネガティブな振れが観測されます。)

サンプル提供;カナダ、Guelph大学Terry Beveridge氏のご好意によります。




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緑膿菌

緑膿菌のAFMイメージです。左が10μmスキャンで、右が4μmスキャンに拡大したものです。

サンプル提供;カナダ、Guelph大学Terry Beveridge氏のご好意によります。




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上皮細胞

上皮細胞のAFM像。80μmスキャン。




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上皮細胞

バイオヒータを用いて37℃の環境に保持したときの、上皮細胞の液中AFM像。80μmスキャン。




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毛細血管内皮細胞

AFMおよびフォーススペクトロスコピーによる、単細胞および単分子測定。(A)ゼラチン基盤上の、ウシの毛細血管内皮細胞のAFM形状イメージ。(B)同細胞のAFM位相イメージで、細胞骨格細部が鮮明に見えています。(C)同細胞上のストレプトアビジンと、ビオチン修飾カンチレバー探針間の、特定リガンド−レセプタの結合破壊を示しています。(D)クリーンなガラス表面と、ビオチン修飾カンチレバー探針間の、不特定結合を表しています。

イメージ提供;A. Chandrasekaran氏とK.J. Van Vliet氏のご好意によります。詳細についてはK.J. Van Vliet, G. Bao and S. Suresh, Acta Materialia 51 (19)5881-5906 (2003).を参照してください。




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DNA

DNAの液中AFMイメージ。 2μmスキャン。

サンプル提供;ハーバード大学のご好意によります。




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DNA

ラムダダイジェスト DNAのAFMイメージ。1.5μmスキャン。高さ2nm です。




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DNA

ラムダダイジェストDNAのAFMイメージ。濃度10μg/m、8μmスキャン。16M以上のメガピクセルイメージ。




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光学位相コントラスト

上皮細胞とAFMカンチレバーの位相コントラストイメージ。




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DNA量子ドット接合

マイカ基盤上のDNA量子ドット接合です。リングの形状はDNAで、突き出ているのはCdSe量子ドットです。ACモード、600nmスキャンでイメージをとりました。

コネチカット大学、材料科学研究所のMinhua Zhao氏, Charduharshini Srinivasan氏, Jeunghoon Lee氏, そして Bryan Huey氏等のご好意によります。




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LBバクテリア培地の結晶性パターン

マイカ上で空気乾燥したLBバクテリア培地の結晶性パターン。 培地の中で成長していたバクテリアは見え難くなります。そこでオリンパスAC160カンチレバーを使い、MFP-3DのACモードでイメージをとりました。75μmスキャン。

南カリフォルニア大学研究員のPamela G. Gross氏のご好意によります。




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ラットの脳内皮細胞

生きたGP8ラット脳内皮細胞。この細胞は、12%PDS (Plasma Derived Serum)を添加した、DMEM/F12(Dulbecco's Modified Eagles Medium with F12 salt)の中で、ラットの尾の部分のコラーゲンでコートしたペトリ皿に乗せ、密集するほど増殖するまで培養しました。イメージ測定時の液温は約31℃です。左のイメージは化学療法前のものです。そのイメージング後、サンプルとAFMヘッドを移動させないで、この濃度では可逆性高浸透圧効果をもつ0.55Mマンニトールを含む同じ溶液で、その培地を交換しました。溶液を交換した後、同一細胞のイメージをとり、マンニトール誘起の変化を見た(右のイメージ)ものです。40μmスキャン。

ハンガリー科学アカデミー生物研究センター、生物物理研究室のZoltan Balint氏とDr. Gyorgy Varos氏のご好意によります。




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歯のエナメル

ヒトの歯のエナメルの“スムーズ”な表面のAFM振幅イメージ。イメージは水溶液(PBSバッファ)中、8μmスキャンでとりました。

ネブラスカ大学、医療センターのDr. L.S. Shlyakhtenko氏のご好意によります。




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緑膿菌バクテリア

ACモードで大気中でイメージングしたマイカ上の単一の緑膿菌バクテリア。5μmスキャン。




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肥満細胞の共焦点顕微鏡像とAFMイメージ

骨髄由来肥満細胞をポリリシンコートのカバースリップに拡散させたものです。細胞は固定され、CellTrace CFSEダイ(Invitrogen社)でラベルし、PBSバッファ中、40μmでスキャンしました。オリンパスFluoView1000コンフォーカル顕微鏡と融合させたアサイラム・リサーチ社開発のMFP-3D-CFを使用してイメージ化しました。この肥満細胞の3Dイメージは、AFMと、コンフォーカル顕微鏡で得られた像を、融合させたものです。AFMは高分解能の表面情報を提供し、他方コンフォーカルは細胞内の蛍光ラベルの分布を示します。イメージ右側の4つの暗い穴に注目してください。上の2つは細胞表面の下にありますが、下の2つは形状像からわかる、表面の特徴です。

フライスルービデオは、IgorProソフトウエアで作った動画です。下記のビデオをダウンロードするとご覧いただけます。
Mastcombined
Mastcombinedqt6
Mastcombinedqt7
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左記は、別々のイメージです。左がコンフォーカル顕微鏡像で、右がAFM凹凸像です。データの融合はARgyle(アーガイル;MFP-3Dシステムソフトウェアに組み込まれた3D表示エンジン)を使用して作成しました。

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